疏水層析
定義：
疏水層析（HIC）是一種液相吸附層析，它是依據(jù)生物分子之間的疏水性的差別來進(jìn)行分離的。固定相由非極性物質(zhì)(如烴類、苯基等)組成的層析，非極性分子間或分子的非極性基團(tuán)間具有吸引力，不同分子的非極性基團(tuán)與固定相的非極性物質(zhì)結(jié)合的強(qiáng)弱不同，從而達(dá)到分離。該方法多用于蛋白質(zhì)的分析和分離。
原理：
蛋白質(zhì)和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水性基團(tuán)，疏水性基團(tuán)可以與疏水性層析介質(zhì)發(fā)生疏水性相互作用而結(jié)合。
不同的分子由于疏水性不同，它們與疏水性層析介質(zhì)之間的疏水性作用力強(qiáng)弱不同，溶液中的高離子強(qiáng)度可以增強(qiáng)蛋白質(zhì)或多肽等生物大分子與疏水性層析介質(zhì)之間的疏水作用。利用這個(gè)性質(zhì)，在高離子強(qiáng)度下將待分離的樣品吸附在疏水性層析介質(zhì)上，然后通過線性或階段降低離子強(qiáng)度選擇性的將樣品解吸。疏水性弱的物質(zhì)，在較高離子強(qiáng)度的溶液時(shí)被洗脫下來，當(dāng)離子強(qiáng)度降低時(shí)，疏水性強(qiáng)的物質(zhì)才隨后被洗脫下來。
疏水層析填料的種類
什么要選擇瓊脂糖凝膠為基架？
基質(zhì)主要有多糖類如瓊脂糖、纖維素和人工合成聚合物類如聚苯乙烯、聚丙烯酸甲酯類。其中，半剛性的瓊脂糖類凝膠仍是應(yīng)用最廣泛的疏水介質(zhì)。
瓊脂糖凝膠具有更強(qiáng)的剛性、更快的傳質(zhì)速度使得瓊脂糖凝膠有更優(yōu)異的壓力流速曲線。
瓊脂糖凝膠具有更高的流速、更靈活的柱床高度使得瓊脂糖凝膠有更靈活的工藝操作窗口。
FF、HP、CL的區(qū)別
FF: 疏水層析介質(zhì)，快流速，適合生物大分子和疫苗的分離純化等。
HP: 疏水層析介質(zhì), 高分辨率，適合生物大分子和疫苗的分離純化等。
CL-4B : 疏水層析介質(zhì)，適合生物大分子和疫苗的分離純化等。
不同配基的區(qū)別
苯基·瓊脂糖凝膠 FF (Phenyl-Berpharose FF)
是一種將苯基鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的較強(qiáng)疏水性疏水層析分離介質(zhì)。
辛基·瓊脂糖凝膠 FF(Octyl-Berpharose FF)
是一種將辛基鍵合在瓊脂糖微球上形成的中等疏水性疏水層析分離介質(zhì)。
丁基·瓊脂糖凝膠FF (Butyl-Berpharose FF)
是一種將丁基鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的較弱疏水性疏水層析分離介質(zhì)。
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